Метод иммуноабсорбционного анализа со связанными ферментами – по-английски Enzyme-Linked Immuno Assay – или тест ELISA – это иммунологический тест, который позволяет обнаруживать или анализировать молекулы в биологическом образце. Он был концептуализирован и разработан двумя шведскими учёными Питером Перлманном и Евой Энгвалл из Стокгольмского университета в 1971 году.

Молекулы, анализируемые методом ELISA, обычно представляют собой белки. Типы образцов включают жидкие биологические материалы – плазму, сыворотку, мочу, пот, среду для культивирования клеток или рекомбинантный белок – белок, вырабатываемый клеткой, генетический материал которой был изменен в результате генетической рекомбинации, – очищенный до раствора.

Тест ELISA в основном используется в иммунологии для обнаружения и/или измерения присутствия белков, антител или антигенов в образце. Этот серологический тест выявляет, в частности, антитела, вырабатываемые организмом в ответ на вирусное заражение.

Использование антител для диагностики инфекционных заболеваний представляет собой специфический и быстрый метод. Метод ELISA представляет собой иммуноферментативный метод, который позволяет визуализировать на биологическом образце реакции между антигеном (телом, которое живой организм считает чужеродным) и антителом, используя цветную реакцию, производимую ферментным маркером. обычно щелочная фосфатаза и пероксидаза – предварительно прикрепленные к антителу. Цветная реакция подтверждает идентификацию выделенной бактерии или наличие искомого вируса, а интенсивность цвета указывает на количество антигенов или антител в данном образце.

Существует четыре основных типа теста ELISA:

• ИФА прямой, позволяет обнаруживать или измерять антитела. Он использует только первичное антитело;
• ИФА непрямой, наиболее широко используемый, также позволяет обнаруживать или анализировать антитела. Он использует вторичное антитело, которое обеспечивает лучшую чувствительность, чем прямой ИФА;
• ИФА на соревнованиях, позволяет дозировать антигены. Произведенный в результате конкуренции за облигации, он не использует фермент;
• ИФА «в сэндвиче», позволяет дозировать антигены. Этот метод широко используется в исследованиях.

Тест ELISA используется для:

• Находить и измерять антитела в серологии для диагностики инфекционных заболеваний: вирусологии, паразитологии, бактериологии и др.;
• Дозы белков в низких концентрациях: специфические дозировки некоторых белков плазмы (иммуноглобулин Е (IgE), ферритин, белковые гормоны и др.), опухолевых маркеров и др.;
• Дозируйте малые молекулы: стероидные гормоны, гормоны щитовидной железы, лекарства…

ИФА-тест используется, в частности, для диагностики многих инфекционных заболеваний:

Венерические заболевания (ЗППП)

В том числе гепатит, сифилис, хламидиоз и ВИЧ. Рекомендованный органами здравоохранения, это основной скрининговый тест на СПИД: он показывает наличие антител к ВИЧ и антигена p24 через шесть недель после заражения.

Региональные или эндемические заболевания

Желтая лихорадка, вирусная болезнь Марбурга (МВМ), Ладенге, болезнь Лайма, Чикунгунья, лихорадка Рифт-Валли, Эбола, лихорадка Ласса и др.

Ковид-19

Тест ELISA, проводимый через более чем 2–3 недели после появления симптомов, позволяет менее чем за час выявить наличие антител против SARS-CoV-2.

Вирусные возбудители, вызывающие внутриутробные инфекции

Например, токсоплазмоз, краснуха, цитомегаловирус, простой герпес.

Другие случаи

Но он также нашел применение в обнаружении:

• Беременность;
• Аутоиммунные заболевания;
• Пищевые аллергены: количественное определение общих иммуноглобулинов Е (IgE) помогает в диагностике и лечении аллергии;
• Гормональные нарушения;
• опухолевые маркеры;
• Вирусы растений;
• И многое другое

В рамках обнаружения антител против SARS-CoV-2 пилотное исследование, проведенное в августе 2020 года Институтом Пастера, CNRS, Inserm и Парижским университетом, подтверждает надежность теста ELISA: оба протестированных теста ELISA используют весь N-белок SARS-CoV-2 (ELISA N) или внеклеточный домен вирусного шипа (S) в качестве целевых антигенов. Этот метод позволит идентифицировать антитела более чем в 90% случаев с очень низким уровнем ложноположительных результатов - 1%.

Анализы Elisa, проводимые в аналитических лабораториях по рецепту врача, стоят около 10 евро и 100% возмещаются медицинской страховкой.

Проводятся в бесплатных информационно-скрининговых и диагностических центрах (CeGIDD), они могут быть бесплатными на ВИЧ и SARS-CoV-2.